9、专门设置随到随学老师接待于不同学员

这项研究在SpragueDawley大鼠中进行。在来自武汉大学口腔医无特定病原体动物实验室的兽医的监督下，将动物饲养在特殊的饲养设施中。食物和水可以随意获得。所有动物实验方案均经武汉大学口腔医院医学伦理**批准。将24只4周龄雌性大鼠随机分为3组：单次注 组（3U/侧）注 到双侧咬肌中一次，三次注 组（3U/侧）注 到双侧咬肌中3次（间隔2周）,对照组注 匹配体积的生理盐水。保妥适（Allergan，Irvine，ca）溶液用每0.1ml盐水1个单位稀释。整个实验过程中没有老鼠意外死亡。对所有动物进行腹膜内注 戊**钠（AS1090AspenTechnology，Bedford，ma）以40mg/kg体重的剂量进行麻醉。10周时，过量的药物被用来杀死老鼠。


参照Hyun的方法在下颌骨X线片上确定标记点和测量距离。研究人员对所有动物样品测量3次以进行统计分析，他们对大鼠接受的治  疗情况不了解。


为了检测矿化软骨和软骨下骨，用微型CT（microCT）测量相关数据。
从被杀死的动物身上解剖出左右下颌骨。标本固定在4%仲甲醛溶液在室温下放置24小时，然后在10%中脱钙依地酸持续5周。在酒精中梯度脱水后，标本被包埋在石蜡中。使用横断面制作六微米矢状断面（德国韦茨拉尔徕卡RM2245）。为了评估各组髁突软骨的形态学和组织学差异，人士们进行了苏木精和曙红（HE）染色和组织化学染色。使用OlympusDP72显微镜（日本东京）观察切片。对于HE染色和组织化学分析，从每只大鼠中选择6个切片，在光学显微镜下，从每个切片中随机选择4个区域，用于在盲法条件下获取数据。用PhotoshopCS6测量髁突软骨细胞区和增生区的总厚度。


为了观察不同频率注 肉   毒 毒   素对下颌骨轮廓尺寸，我们检查放影像来测量下颌骨的形态学参数（图1A和B），发现3单次和三次注 肉   毒 毒   素组的下颌高度（CoH和CdH）均低于对照组（图1C）。值得注意的是，三次注 组的CdH低于单次注 组（图1D），单次和三次注 肉   毒 毒   素组的下颌长度（CoL、CdL和GoL）均短于对照组（图1F-H）。类似地，三联注 组的CoL和CdL低于单次注 组（图1,F和G）。与单次注 相比，三次肉   毒 毒   素注 导致下颌轮廓大程度的下降。




因为髁突是下颌骨的生长点，所以进一步分析了髁突的形态学变化。这显微分析表明，与对照组相比，肉   毒 毒   素注 组的皮质和骨小梁BV显著降低。具体地，来自单次注 组的结果显示：（1）髁颈的皮质骨体积损失了平均4.65%的体积（P>0.05）（图2A）;（2）BV/TV下降了近10.44%（P<0.05）（图2B）;（3）骨小梁数目含量下降了近41.01%（P<0.05）（图2C）;（4）骨小梁厚度下降了12.8%（P<0.05）（图2D）;（5）骨小梁分离度上涨5.51%（P<0.05）（图2E）。


三次注 组的结果显示


（1）髁突颈部皮质骨体积平均减少24.42%（P<0.05）（图2A）;（2）BV/TV下降了近27.71%（P<0.05）（图2B）;（3）骨小梁数目含量减小了近50.77%（P<0.05）（图2C）;（4）骨小梁厚度下降了23.38%（P<0.05）（图2D）;（5）骨小梁分离度上涨7.77%（P<0.05）（图2E）。为了便于观察髁突的形态学变化，通过髁突的microCT扫描进行了三维重建。单次注 组的髁突后表面比对照组粗糙（图2F,G,I,J,L，以及M），而三次注 组表面有明显的凹陷吸收（图2,H,K，以及N）。三次注 肉   毒 毒   素导致髁突中皮质和小梁的BV降低。